РЕЗЮМЕ И ОБЪЯСНЕНИЕ ТЕСТА
Висцеральный лейшманиоз, или кала-азар, представляет собой диссеминированную инфекцию, вызываемую несколькими подвидами L. donovani.По оценкам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), от этого заболевания страдают около 12 миллионов человек в 88 странах.Он передается человеку через укусы москитов рода Phlebotomus, которые заражаются при питании инфицированными животными.Хотя это заболевание встречается в бедных странах, в Южной Европе оно стало ведущей оппортунистической инфекцией у больных СПИДом.Идентификация организма L. donovani в крови, костном мозге, печени, лимфатических узлах или селезенке обеспечивает определенный способ диагностики.Серологическое обнаружение анти-L.donovani IgM оказался превосходным маркером острого висцерального лейшманиоза.Тесты, используемые в клинике, включают ИФА, флуоресцентные антитела или тесты прямой агглютинации 4-5.Недавно использование специфического белка L. donovani в тесте значительно улучшило чувствительность и специфичность.
Комбинированный экспресс-тест Leishmania IgG/IgM представляет собой серологический тест на основе рекомбинантных белков, который одновременно выявляет антитела IgG и IgM к L. Donovani.Тест дает надежный результат в течение 15 минут без каких-либо инструментов.
ПРИНЦИП
Экспресс-тест Leishmania IgG/IgM представляет собой хроматографический иммуноанализ с латеральным потоком.Тест-кассета состоит из: 1) прокладки конъюгата бордового цвета, содержащей рекомбинантный антиген L. donovani, конъюгированный с коллоидным золотом (конъюгаты Leishmania) и конъюгаты IgG кролика с золотом, 2) полоски нитроцеллюлозной мембраны, содержащей две тест-полосы (полосы Т1 и Т2). и контрольная полоса (полоса C).Полосу T1 предварительно покрывают моноклональным античеловеческим IgM для обнаружения анти-L.donovani IgM, полоса T2 предварительно покрыта реагентами для обнаружения анти-L.donovani IgG, а С-полоса предварительно покрыта козьим антикроличьим IgG.
Когда достаточный объем испытуемого образца подается в лунку для образца кассеты, образец мигрирует по кассете под действием капиллярных сил.IgM L. donovani, если он присутствует в образце, будет связываться с конъюгатами Leishmania.Затем иммунокомплекс захватывается на мембране предварительно покрытым антителом против человеческого IgM, образуя полосу T1 бордового цвета, что указывает на положительный результат теста на L. donovani IgM.IgG L. donovani, если он присутствует в образце, будет связываться с конъюгатами Leishmania.Затем иммунокомплекс захватывается реагентами, предварительно нанесенными на мембрану, образуя полосу Т2 бордового цвета, что указывает на положительный результат теста на IgG L. donovani.
Отсутствие каких-либо Т-полос (Т1 и Т2) свидетельствует об отрицательном результате.Тест содержит внутренний контроль (полоса C), который должен демонстрировать бордовую полосу иммунокомплекса конъюгата козьего антикроличьего IgG/кроличьего IgG-золота независимо от развития окраски на любой из полос T.В противном случае результат теста недействителен, и образец должен быть повторно протестирован с другим устройством.
